抗微生物/中和内毒素的多肽

1.一种分离的呈下式的多肽：
                      B1-R1-B2-R2
其中B1和B2表示含有2-7个氨基酸的簇，这2-7个氨基酸中至少2个 是强碱性的；R1是17-21个氨基酸，且亲水性总平均值至少为-0.609，脂族 指数值至少为35.45；R2是1-17氨基酸，亲水性总平均值至少为0.174，脂族 指数值至少为97.14；此多肽的氨基酸连接形成一条单连续的酰胺键主链。
2.如权利要求1所述的分离的多肽，其特征在于，所述的R2是 PVSCIKRDSPIQCIQAIA。
3.如权利要求1所述的分离的多肽，其特征在于，所述的B1是GRRRRS或 其至少保留RR的截短物。
4.如权利要求1所述的分离的多肽，其特征在于，所述的B2是MRKVRG。
5.如权利要求1所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽含有SEQ ID NO：2。
6.如权利要求5所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽含有取代谷氨 酸16的中性氨基酸。
7.如权利要求6所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽含有取代谷氨 酸16的甘氨酸。
8.如权利要求5所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽具有取代谷氨 酸16的疏水氨基酸。
9.如权利要求8所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽具有取代谷氨 酸16的缬氨酸。
10.如权利要求8所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽具有取代谷 氨酸16的丙氨酸。
11.一种分离的呈下式的多肽：
                         B1-R1-B2
其中B1和B2表示含有2-7个氨基酸的簇，这2-7个氨基酸中至少2个 是强碱性的；R1是17-21个氨基酸，其亲水性总平均值至少为-0.609和脂族 指数值至少为35.45；此多肽的氨基酸连接形成一条单连续的酰胺键主链，具 体上不包括SEQ ID NO：1的多肽。
12.如权利要求11所述的分离的多肽，其特征在于，所述的B1是GRRRRS 或其至少保留RR的截短物。
13.如权利要求11所述的分离的多肽，其特征在于，所述的B2是MRKVRG。
14.如权利要求11所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽包括以中性 氨基酸取代谷氨酸16的SEQ ID NO：1。
15.如权利要求14所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽含有替代谷 氨酸16的甘氨酸。
16.如权利要求11所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽包括以疏水 氨基酸替代谷氨酸16的SEQ ID NO：1。
17.如权利要求16所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽具有取代谷 氨酸16的缬氨酸。
18.如权利要求16所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽具有取代谷 氨酸16的丙氨酸。
19.一种抗微生物多肽或其功能性变体，其特征在于，包括SEQ ID NO：2的 氨基酸1-51或其片断，其中在C-端缺失至多20个氨基酸，该抗微生物多肽 或其功能性变体的氨基酸连接形成一条单连续的酰胺键主链，功能性变体在2、 3、4、5、28、29、31、39和40位为碱性残基，在7、9、10、11、12、17、 18、20、21、23、32、35、37、38、44、46、47、49和50位为疏水性残基、 且在16和41位为酸性残基，具体上不包括SEQ ID NO：1的多肽。
20.如权利要求19所述的抗微生物多肽或其功能性变体，其特征在于， 在16和/或41位具有中性氨基酸取代。
21.如权利要求20所述的抗微生物多肽或其功能性变体，其特征在于，所述 的中性氨基酸取代是疏水氨基酸。
22.如权利要求19所述的抗微生物多肽或其功能性变体，其特征在于，其中 在N端缺失至多2个氨基酸。
23.一种中和内毒素的多肽或其功能性变体，其特征在于，包括SEQ ID NO：2 的氨基酸1-51或其片断，其中在C-端缺失至多20个氨基酸，该抗微生物多 肽或其功能性变体的氨基酸连接形成一条单连续的酰胺键主链，功能性变体在 2、3、4、5、28、29、31、39和40位为碱性残基，在7、9、10、11、12、17、 18、20、21、23、32、35、37、38、44、46、47、49和50位为疏水性残基、 且在16和41位为酸性残基，具体上不包括SEQ ID NO：1的多肽。
24.如权利要求23所述的中和内毒素的多肽或其功能性变体，其特征在 于，在16和/或41位具有中性氨基酸取代。
25.如权利要求24所述的抗微生物多肽或其功能性变体，其特征在于，所述 的中性氨基酸取代是疏水氨基酸。
26.如权利要求23所述的抗微生物多肽或其功能性变体，其特征在于，其中 在N端缺失至多2个氨基酸。
27.一种融合蛋白，其特征在于，该融合蛋白是由第一种多肽和第二种多肽 融合而产生的，第一种多肽是中和内毒素的多肽或其功能性变体，它包含SEQ ID NO：2的氨基酸1-51或其片断，其中在C-端缺失至多20个氨基酸，该SEQ ID NO：2或其功能性变体的氨基酸连接形成一条单连续的酰胺键主链，功能性变体 在2、3、4、5、28、29、31、39和40位为碱性残基，在7、9、10、11、12、 17、18、20、21、23、32、35、37、38、44、46、47、49和50位为疏水性残 基、且在16和41位为酸性残基；第二种多肽含有细胞通过胞吞清除途径识别 和内化的蛋白质区域。
28.如权利要求27所述的融合蛋白，其特征在于，所述的中和内毒素的 多肽或其功能性变体具有SEQ ID NO：2的N端缺失至多2个氨基酸。
29.如权利要求27所述的融合蛋白，其特征在于，所述的中和内毒素多 肽在16和/或41位具有中性氨基酸取代。
30一种治疗或预防个体受微生物感染而患病的治疗方法，其特征在于，所述 的方法包括：
a)给予含有SEQ ID NO：2的氨基酸1-51或其功能性变体的抗微生物多肽， 其中SEQ ID NO：2的C端缺失至多20个氨基酸，SEQ ID NO：2或其功能性变体的 N端缺失至多2个氨基酸，所述的抗微生物多肽或其功能性变体的氨基酸连接形成 一条单连续的酰胺键主链；和
b)给予个体治疗剂量的该抗微生物多肽或其功能性变体。
31.如权利要求30所述的治疗方法，其特征在于，所述的微生物感染是细菌 感染。
32.如权利要求31所述的治疗方法，其特征在于，所述细菌感染导致个体细 菌性脓毒病。
33.如权利要求32所述的治疗方法，其特征在于，所述的抗微生物多肽还可 作为中和内毒素多肽起作用。
34.如权利要求31所述的治疗方法，其特征在于，所述的细菌感染是由分枝 杆菌引起的。
35.如权利要求34所述的治疗方法，其特征在于，所述的疾病是结核病或麻 风病。
36.如权利要求30所述的治疗方法，其特征在于，所述的微生物感染是真菌 感染。
37.如权利要求30所述的治疗方法，其特征在于，所述的功能性变体包括如 下式的分离的多肽：
                       B1-R1-B2
其中B1和B2表示含有2-7个氨基酸的簇，这2-7个氨基酸中至少2个 是强碱性的；R1是17-21个氨基酸，其亲水性总平均值至少为-0.609，脂族 指数值至少为35.45。
38.如权利要求30所述的治疗方法，其特征在于，所述的功能性变体包括如 下式的分离的多肽：
                       B1-R1-B2-R2
其中B1和B2表示含有2-7个氨基酸的簇，这2-7个氨基酸中至少2个 是强碱性的；R1是17-21个氨基酸，其亲水性总平均值至少为-0.609，脂族 指数值至少为35.45；R2是1-17个氨基酸，亲水性总平均值至少为0.174，脂 族指数值至少为97.14。
39.如权利要求30所述的治疗方法，其特征在于，所述的功能性变体的特征 是在2、3、4、5、28、29、31、39和40位为碱性残基和在7、9、10、11、12、 17、18、20、21、23、32、35、37、38、44、46、47、49和50位为疏水性残 基，且在16和41位为酸性残基。
40.一种强化抗微生物药物对患者治疗作用的方法，其特征在于，所述的 方法包括：
a)给予含有SEQ ID NO：2的氨基酸1-51或其功能性变体的抗微生物药物和 分离的多肽，其中SEQ ID NO：2的C端缺失至多20个氨基酸，SEQ ID NO：2或该 分离的多肽的功能性变体的N端缺失至多2个氨基酸，所述的分离的多肽或其功 能性变体的氨基酸连接形成一个单连续的酰胺键主链；和
b)给予患者治疗剂量的抗微生物药物和步骤a)的分离的多肽或其功能性变体。
41.如权利要求40所述的方法，其特征在于，所述的抗微生物药物是抗生素。
42.如权利要求41所述的方法，其特征在于，所述的抗生素是利福平或其衍 生物。
43.如权利要求41所述的方法，其特征在于，所述的抗生素是异烟肼或其衍 生物。
44.如权利要求40所述的治疗方法，其特征在于，所述的功能性变体包括如 下式的分离的多肽：
                         B1-R1-B2
其中B1和B2表示含有2-7个氨基酸的簇，这2-7个氨基酸中至少2个 是强碱性的；R1是17-21个氨基酸，其亲水性总平均值至少为-0.609，脂族 指数值至少为35.45。
45.如权利要求40所述的治疗方法，其特征在于，所述的功能性变体包括如 下式的分离的多肽：
                          B1-R1-B2-R2
其中B1和B2表示含有2-7个氨基酸的簇，这2-7个氨基酸中至少2个 是强碱性的；R1是17-21个氨基酸，其亲水性总平均值至少为-0.609，脂族 指数值至少为35.45；R2是1-17个氨基酸，亲水性总平均值至少为0.174，脂 族指数值至少为97.14。
46.如权利要求40所述的治疗方法，其特征在于，所述的功能性变体的特征 是在2、3、4、5、28、29、31、39和40位为碱性残基和在7、9、10、11、12、 17、18、20、21、23、32、35、37、38、44、46、47、49和50位为疏水性残 基，且在16和41位为酸性残基。
47.一种中和产品中内毒素的方法，其特征在于，所述的方法包括：
a)给予含有SEQ ID NO：2的氨基酸1-51或其功能性变体的分离的中和内毒 素多肽，其中SEQ ID NO：2的C端缺失至多20个氨基酸，SEQ ID NO：2的N端缺 失至多2个氨基酸，所述的中和内毒素多肽或其功能性变体的氨基酸连接形成一条 单连续的酰胺键主链；和
b)将产品与该分离的中和内毒素多肽或其功能性变体接触。
48.如权利要求47所述的方法，其特征在于，所述的功能性变体包括如下式 的分离的多肽：
                          B1-R1-B2
其中B1和B2表示含有2-7个氨基酸的簇，这2-7个氨基酸中至少2个 是强碱性的；R1是17-21个氨基酸，其亲水性总平均值至少为-0.609，脂族 指数值至少为35.45。
49.如权利要求47所述的方法，其特征在于，所述的功能性变体包括如下式 的分离的多肽：
                          B1-R1-B2-R2
其中B1和B2表示含有2-7个氨基酸的簇，这2-7个氨基酸中至少2个 是强碱性的；R1是17-21个氨基酸，其亲水性总平均值至少为-0.609，脂族 指数值至少为35.45；R2是1-17个氨基酸，亲水性总平均值至少为0.174，脂 族指数值至少为97.14。
50.如权利要求47所述的方法，其特征在于，所述的功能性变体的特征是在 2、3、4、5、28、29、31、39和40位为碱性残基，在7、9、10、11、12、17、 18、20、21、23、32、35、37、38、44、46、47、49和50位为疏水性残基， 且在16和41位为酸性残基。
51.如权利要求47所述的方法，其特征在于，所述的产品是药物。
52.如权利要求47所述的方法，其特征在于，所述的产品是生物制品。
53.如权利要求52所述的方法，其特征在于，所述的生物制品是食品。
54.如权利要求52所述的方法，其特征在于，所述的生物制品包括活细胞。
55.如权利要求52所述的方法，其特征在于，所述的生物制品是由活细胞衍 生的。
56.如权利要求52所述的方法，其特征在于，所述的生物制品是药物。
57.一种中和患者体内循环性内毒素的方法，其特征在于，所述的方法包括：
a)给予一种融合蛋白，该融合蛋白是由第一种多肽和第二种多肽融合而产生 的，第一种多肽是中和内毒素的多肽或其功能性变体，它包含SEQ ID NO：2的氨 基酸1-51或其片断，其中在C-端缺失至多20个氨基酸，SEQ ID NO：2或其 功能性变体的氨基酸连接形成一条单连续的酰胺键主链，功能性变体在2、3、 4、5、28、29、31、39和40位为碱性残基和在7、9、10、11、12、17、18、 20、21、23、32、35、37、38、44、46、47、49和50位为疏水性残基、且在 16和41位为酸性残基；第二种多肽含有细胞通过胞吞清除途径识别和内化的 蛋白质区域；和
b)将治疗剂量的步骤a)的融合蛋白给予所述的患者。
58.如权利要求57所述的治疗方法，其特征在于，所述的中和内毒素的 多肽在16和/或41位具有中性氨基酸取代。
59.一种增加体内从乳铁蛋白(LF)产生的6kDa宿主防御多肽产量的方 法，其特征在于，所述的方法是通过提高LF对蛋白酶活性的敏感性。
60.如权利要求59所述的方法，其特征在于，所述的蛋白酶是天冬氨酸 蛋白酶。
61.如权利要求60所述的方法，其特征在于，所述的天冬氨酸蛋白酶是 组织蛋白酶D。
62.如权利要求59所述的方法，其特征在于，通过将LF与聚阴离子接触 提高LF的敏感性。
63.一种增加体内从乳铁蛋白(LF)产生的6kDa宿主防御多肽产量的方 法，其特征在于，所述的方法是通过提高体内蛋白酶的活性。
64.如权利要求63所述的方法，其特征在于，所述的蛋白酶是天冬氨酸 蛋白酶。
65.如权利要求64所述的方法，其特征在于，通过将蛋白酶的直接环境 的pH调节在3.5-5.0之间，来提高蛋白酶的活性。
66.一种强化LF宿主防御多肽或其功能性变体的中和内毒素和抗微生物 活性的方法，其特征在于，所述的方法是通过将该多肽的直接环境调节到生理 至亚生理离子强度范围的条件下。
67.如权利要求66所述的方法，其特征在于，将该多肽的直接环境的离子强 度调节至200mM NaCl以下。
68.如权利要求67所述的方法，其特征在于，将该多肽的直接环境的离子强 度调节到相当于150mM NaCl或以下。
69.如权利要求68所述的方法，其特征在于，将该多肽的直接环境的离子强 度调节到相当于50mM NaCl或以下。
70.一种中和内毒素的方法，其特征在于，所述的方法包括使内毒素与包含 SEQ ID NO：6的1-27氨基酸或其功能性变体的多肽接触。
71.如权利要求47所述的方法，其特征在于，所述的中和内毒素的多肽仅包 含一个碱性残基的功能簇。
72.一种如下式的分离的多肽：
                      B1-R1-B2
其中B1和B2表示含有2-7个氨基酸的簇，这2-7个氨基酸中至少2个 是强碱性的；R1是17-21个氨基酸，其亲水性总平均值至少为-0.609，脂族 指数值至少为35.45，该多肽的氨基酸连接起来形成单连续的酰胺键主链，将 该多肽与药学上可接受的载体一起配制以给予哺乳动物。
73.一种抗微生物多肽或其功能性变体，其特征在于，它包含SEQ ID NO：2 的氨基酸1-51或其功能性片断，其中在C-端缺失至多20个氨基酸，在N端 缺失至多2个氨基酸，该抗微生物多肽或其功能性变体的氨基酸连接形成一条 单连续的酰胺键主链，其功能性变体的特征是在2、3、4、5、28、29、31、39 和40位为碱性残基和在7、9、10、11、12、17、18、20、21、23、32、35、 37、38、44、46、47、49和50位为疏水性残基、且在16和41位为酸性残基； 将此抗微生物多肽或其功能性变体与药学上可接受的载体一起配制，以给予哺 乳动物。
74.一种中和内毒素的多肽或其功能性变体，其特征在于，它包含SEQ ID NO：2的氨基酸1-51或其功能性片断，其中在C-端缺失至多20个氨基酸，在 N端缺失至多2个氨基酸，该中和内毒素多肽或其功能性变体的氨基酸连接形 成一条单连续的酰胺键主链，其功能性变体在2、3、4、5、28、29、31、39 和40位为碱性残基，在7、9、10、11、12、17、18、20、21、23、32、35、 37、38、44、46、47、49和50位为疏水性残基、且在16和41位为酸性残基； 将此中和内毒素多肽或其功能性变体与药学上可接受的载体一起配制，以给予 哺乳动物。

暂无