一种白菜成熟花粉细胞荧光原位杂交的方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201610135140.9
IPC分类号：C12Q1/6841
申请日期：
2016-03-10
申请人：
河北农业大学

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专利名称	一种白菜成熟花粉细胞荧光原位杂交的方法
申请号	CN201610135140.9	申请日期	2016-03-10
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2017-05-10	公开/公告号	CN106636320A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/6841 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕 C12Q1/6813 杂交分析〔2018.01〕 C12Q1/6841 原位杂交〔2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8;4;1查看分类表>
申请人	河北农业大学	申请人地址	河北省保定市灵雨寺街289号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	河北农业大学	当前权利人	河北农业大学
发明人	轩淑欣;申书兴;冯大领;王彦华;陈雪平
代理机构	暂无	代理人	暂无

摘要

本发明属于作物分子细胞遗传学技术领域，具体涉及一种白菜成熟花粉细胞荧光原位杂交的方法。该方法步骤包括白菜成熟花粉时期花蕾的确定、成熟花粉细胞制片、探针标记、原位杂交和信号检测等。本发明的特点是：取白菜开花前1‑2d的花蕾，在50%冰醋酸溶液中分离出新鲜花粉粒，采用垂直压片法破碎花粉壁，释放出完整的营养细胞与生殖细胞；细胞标本经预处理后与变性探针在80℃共变性3min，直接进行原位杂交，获得了信号清晰的荧光杂交图片，揭示出目标DNA在营养细胞和生殖细胞中的信号表现差异。本发明填补了十字花科芸薹属植物成熟花粉细胞荧光原位杂交技术空白，应用于白菜花粉发育的分子细胞遗传学研究中。

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