抗乙肝胎盘转移因子注射液的制备方法

1.一种抗乙型肝胎盘转移因子注射液的制备方法，其特征是： 选用乙型肝炎病毒标志物抗原阴性抗体阳性胎盘为制备原料，其制备 方法由以下步骤组成：
A.取乙型肝炎病毒标志物抗原阴性抗体阳性的胎盘，将其剪成 小块，反复冻融3～5次；
B.在胎盘中加入适量的重蒸馏水，将其磨碎；
C.加入氯化钠溶液，使匀浆内氯化钠重量比浓度为0.9％；
D.向匀浆内加入36％甲醛，使匀浆内含甲醛体积比浓度为0 .125％；
E.将匀浆置于56℃水浴5-15小时，并不断搅拌；
F.将匀浆离心，取离心后的上清液以NaOH调整PH值为6.8 ～7.0；
G.将上述液体静置于35℃-40℃孵箱内100小时以上；
H.将上述液体进行过滤和超滤。

本发明涉及一种抗乙肝胎盘转移因子注射液的制备方法。\n现在已知急慢性乙型肝炎患者均存在细胞免疫功能低下现象， 因而急性乙型肝炎患者病后少数不能顺利清除体内病毒，转为慢 性；慢性肝炎(慢性迁延型、慢性活动型、慢活肝体早期肝硬变 和肝硬变)则因免疫功能低下，体内长期存在乙肝病毒、肝组织 不断受到免疫反应破坏，由慢性肝火缓慢转入早期肝硬变，再转 为肝硬变，甚至在肝硬变基础上再出现肝细胞癌变。因此，试用 免疫调节剂提高病体免疫功能，特别是细胞免疫功能，促进肝内 病变恢复和血内乙肝病毒阴转，是70年代后探讨重点。在现有 的各种免疫调节剂中，虽多可证明对人体具有程度不一的非特异 免疫活性，但并不能证明对乙肝病毒具有明确的特异免疫活性， 因而治疗效果亦较差。因此，治疗乙肝病毒感染的特异性免疫调 节剂一直是近年研究探讨的重点。\n转移因子是免疫调节剂之一，自50年代初提出到现在，国 外仍以人体的细胞，特别是淋巴细胞为提取原材料，由于材料难 得，价格昂贵，特别缺乏对乙肝病毒明确特异活性，结果限制了 推广使用。试用大动物相应器官组织，作原材料或先给抗原注射 致敏，制备普通转移因子(非特异性)或特异性转移因子，除同 样存在上述缺点外，尚有人畜有别问题。近年国内虽有一些有关 从胎盘中提取转移因子的报道，如：郭金刚等著《胎盘转移因子 的提取、理化性法及临床应用》(江苏省金县科技委员会资料1 984/10)，刘月新等著《一种新的免疫调节剂-胎盘因子 的制备与研究》(中国免疫学杂志1985，1(5))，但他们 所用胎盘均为普通胎盘，缺乏对乙肝病毒明确特异免疫活性。\n本发明的目的是研制一种以乙肝病毒感染致敏的胎盘为原料， 用经过改进的提取转移因子注射液的方法，克服上述不足之处， 制备抗乙肝特异性转移因子注射液。\n本发明的目的是这样实现的：选用乙型肝炎病毒标志物抗原、 抗体阳性或抗原阴性、抗体阳性胎盘为原料，将胎盘剪成小块， 反复冻融3～5次，加入适量的重蒸馏水，将其磨碎；再加入氯 化钠溶液，使其在胎盘浆中的浓度为0.9％(重量比)，搅匀， 向匀浆内加入36％甲醛，使匀浆内含甲醛浓度为0.125％(体积 比)，置56℃水浴5-15小时，并不断搅拌；将匀浆离心后 取上清液以NaOH调整PH值调整PH值为6.8～7.0；再静置 于35℃-40℃孵箱内100小时以上；将上述液体进行过滤、 超滤后即成抗乙肝胎盘特异性转移因子注射液。\n本发明原料易得，制备工艺亦不太复杂，实验证明除非特异 免疫活性外，对乙肝病毒尚有明确特异性免疫活性，治疗效果较 好，无任何毒剂反应。\n下面结合实施例对本发明作进一步说明。\n取出乙型肝炎病毒标志抗原阴性、抗体阳性胎盘，将其洗净， 切成小碎块，反复冻融3次；置于胶体磨内(或高速捣碎机内)， 加胎盘相等重量重蒸馏水，反复研磨(捣碎)3次；加入3倍胎 盘重量1.2％氯化钠溶液，搅匀，使匀浆内含氯化钠0.9％(重量 比)，胎盘组织与水的重量比为1∶4；加入36％甲醛，使匀浆 内含甲醛浓度为0.125％(V/V)，混匀后，置56℃水浴5 小时，并不断搅拌使温度均匀；匀浆经3000VPM离心20分钟， 取出上清液用NaOH调整PH为6.8～7.0，再静置35℃孵箱 内100小时；然后用西氏滤器、甲3除菌板过滤，G6耐酸滤过 漏斗除菌过滤，再用截面分子量10000道而顿超滤膜超滤，即成 抗乙肝胎盘特异性转移因子注射液。