一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用

发明专利有效专利

申请号：
CN201810220691.4
IPC分类号：C12N15/113;C12N15/85;C12N15/90;C12N5/10
申请日期：
2018-03-16
申请人：
华南农业大学

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专利名称	一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用
申请号	CN201810220691.4	申请日期	2018-03-16
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2018-09-04	公开/公告号	CN108486108A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/113 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/113 调节基因表达的非编码核酸，如反义寡核苷酸〔2010.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;1;3;;;C;1;2;N;1;5;/;8;5;;;C;1;2;N;1;5;/;9;0;;;C;1;2;N;5;/;1;0查看分类表>
申请人	华南农业大学	申请人地址	广东省广州市天河区五山路483号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	华南农业大学	当前权利人	华南农业大学
发明人	亓文宝;梁佳琪;刘墅楷;邢金超;胡平生;黄丽红;廖明
代理机构	广州市华学知识产权代理有限公司	代理人	崔红丽

摘要

本发明公开一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用，属于分子生物学领域。本发明提供一种靶向敲除人HMGB1基因的gRNA序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。利用CRISPR‑Cas9技术首次在人Huh7细胞基因组上敲除HMGB1基因，使得HMGB1蛋白的表达完全丧失，获得HMGB1敲除的Huh7细胞株，且敲除细胞株形态、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的HMGB1敲除的细胞模型；且操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究HMGB1蛋白在自噬、凋亡、细胞炎症、病毒感染等方面的具体作用机制。本发明获得的细胞株能够显著增强乙型脑炎病毒毒株的感染。

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