抗病毒中药组合物及其制备方法和用途

1.一种抗病毒中药组合物，其包括以下配比的原料药：30-70重量份的蒲公英，20-40重量份的百部，20-40重量份的山慈菇；所述病毒选自甲型流感病毒、寨卡病毒、或登革热病毒、或基孔肯雅病毒。
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述蒲公英为35-65重量份，百部为20-
40重量份，山慈菇为20-40重量份。
3.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述蒲公英为35-65重量份，百部为20-
35重量份，山慈菇为20-35重量份。
4.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述蒲公英为40-50重量份，百部为20-
40重量份，山慈菇为20-40重量份。
5.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述蒲公英为40-50重量份，百部为20-
35重量份，山慈菇为20-35重量份。
6.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述蒲公英为40-50重量份，百部为25-
33重量份，山慈菇为25-33重量份。
7.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述中药组合物额外包括选自葛根、白术和白薇之中的至少一种原料药，其中各原料药的用量比例为：蒲公英为30-70重量份，百部为20-40重量份，山慈菇为20-40重量份，白薇如果存在则为19-51重量份，葛根如果存在则为19-51重量份，白术如果存在则为20-60重量份。
8.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述中药组合物包括蒲公英、百部、山慈菇、葛根、白术、白薇原料药，其中各原料药的用量比例为：蒲公英为35-65重量份，百部为
20-35重量份，山慈菇为20-35重量份，白薇为20-44重量份，葛根为20-44重量份，白术为25-
55重量份。
9.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述中药组合物包括蒲公英、百部、山慈菇、葛根、白术、白薇原料药，其中各原料药的用量比例为：蒲公英为40-50重量份，百部为
20-35重量份，山慈菇为20-35重量份，白薇为20-44重量份，葛根为20-44重量份，白术为25-
55重量份。
10.一种抗病毒中药组合物，其包括原料药蒲公英、百部、山慈菇的提取物，其中各原料药的相对比例如下：蒲公英为30-70重量份，百部为20-40重量份，山慈菇为20-40重量份；所述病毒选自甲型流感病毒、寨卡病毒、登革热病毒、或基孔肯雅病毒。
11.如权利要求10所述的中药组合物，其中所述提取物是指原料药的水提取物和/或乙醇提取物。
12.如权利要求10或11所述的中药组合物，其特征在于所述蒲公英为35-65重量份，百部为20-40重量份，山慈菇为20-40重量份。
13.如权利要求10或11所述的中药组合物，其特征在于所述蒲公英为35-65重量份，百部为20-35重量份，山慈菇为20-35重量份。
14.如权利要求10或11所述的中药组合物，其特征在于所述蒲公英为40-50重量份，百部为20-40重量份，山慈菇为20-40重量份。
15.如权利要求10或11所述的中药组合物，其特征在于所述蒲公英为40-50重量份，百部为20-35重量份，山慈菇为20-35重量份。
16.如权利要求10或11所述的中药组合物，其特征在于所述蒲公英为40-50重量份，百部为25-33重量份，山慈菇为25-33重量份。
17.如权利要求10或11所述的中药组合物，其特征在于所述中药组合物额外包括选自葛根、白术和白薇之中的至少一种原料药的提取物，其中各原料药的用量比例为：蒲公英为
30-70重量份，百部为20-40重量份，山慈菇为20-40重量份，白薇如果存在则为19-51重量份，葛根如果存在则为19-51重量份，白术如果存在则为20-60重量份。
18.如权利要求10或11所述的中药组合物，其特征在于所述中药组合物包括蒲公英、百部、山慈菇、葛根、白术、白薇原料药的提取物，其中各原料药的用量比例为：蒲公英为35-65重量份，百部为20-35重量份，山慈菇为20-35重量份，白薇为20-44重量份，葛根为20-44重量份，白术为25-55重量份。
19.如权利要求10或11所述的中药组合物，其特征在于所述中药组合物包括蒲公英、百部、山慈菇、葛根、白术、白薇原料药的提取物，其中各原料药的用量比例为：蒲公英为40-50重量份，百部为20-35重量份，山慈菇为20-35重量份，白薇为20-44重量份，葛根为20-44重量份，白术为25-55重量份。
20.一种抗病毒中药组合物的制备方法，其包括：
1)取蒲公英、百部药材，加醇提取，得醇提取物；
2)将步骤1)醇提取物的制备中生成的药渣与山慈菇药材合并，加水提取，将所得水提取液浓缩后加醇沉淀，取上清液得水提取物；
3)合并步骤1)所得醇提取物和步骤2)所得水提取物，经任选的后处理步骤即得到所述抗病毒中药组合物；
其中各药材的用量如下：蒲公英为30-70重量份，百部为20-40重量份，山慈菇为20-40重量份；所述病毒选自甲型流感病毒、寨卡病毒、登革热病毒、或基孔肯雅病毒。
21.如权利要求20所述的制备方法，其中所述的醇是40-95％的乙醇水溶液。
22.一种抗病毒中药组合物的制备方法，其包括：
1)取蒲公英、百部、白薇药材，加醇提取，得醇提取物；
2)将步骤1)醇提取物的制备中生成的药渣与葛根、白术、山慈菇药材合并，加水提取，将所得水提取液浓缩后加醇沉淀，取上清液得水提取物；
3)合并步骤1)所得醇提取物和步骤2)所得水提取物，经任选的后处理步骤即得到所述抗病毒中药组合物；
其中各药材的用量如下：蒲公英为30-70重量份，百部为20-40重量份，山慈菇为20-40重量份，白薇为19-51重量份，葛根为19-51重量份，白术为20-60重量份；所述病毒选自甲型流感病毒、寨卡病毒、登革热病毒、或基孔肯雅病毒。
23.如权利要求22所述的制备方法，其中所述的醇是40-95％的乙醇水溶液。
24.一种抗病毒口服药物制剂，其包含如权利要求10-19任一项所述的中药组合物和可药用载体或助剂，其中所述病毒选自甲型流感病毒、寨卡病毒、登革热病毒、或基孔肯雅病毒。
25.如权利要求1-19任一项所述的中药组合物在制备用于治疗或预防病毒感染性疾病或病症的药物中的用途，所述病毒感染性疾病或病症选是由甲型流感病毒、寨卡病毒、登革热病毒、或基孔肯雅病毒所导致的疾病或病症或其组合。
26.如权利要求25所述的用途，所述药物是口服药物。

抗病毒中药组合物及其制备方法和用途\n发明领域\n[0001] 本发明属于药物研究开发领域，涉及了具有抗多种急性传染病毒毒株的中药组合物，特别涉及一种能抗甲型流感病毒、寨卡病毒、登革热病毒及基孔肯雅病毒等病毒的中药组合物及其制备和应用。\n[0002] 发明背景\n[0003] 甲型流感病毒、寨卡病毒(ZIKV)、登革热病毒(DEN)、基孔肯雅病毒(CHIKV)由于传播途径普遍，通过蚊煤或呼吸道传播导致病毒迅速蔓延，传染性强、死亡率极高，对人类健康造成了很大威胁。人们已经对这些病毒进行了广泛研究。从分类学上看，甲型流感病毒属正粘液病毒科(Orthomyxoviridae)；寨卡病毒和登革热病毒属黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus)；基孔肯雅病毒属披膜病毒科(Togaviridae)甲病毒属(alphavirus)。\n但是，防治甲型流感病毒、寨卡病毒、登革热病毒、基孔肯雅病毒是世界性难题。目前针对这些急性传染病病毒的预防和治疗没有有效的药物和令人满意的临床治疗方案：\n[0004] 1、临床用于甲型流感病毒防治药物主要包括M2离子通道抑制剂和神经氨酸酶抑制剂两大类，金刚烷胺和金刚乙胺的不良反应包括神经毒性等，但同时一般会在开始治疗后2至3天就出现耐药株。奥司他韦不良反应主要为消化道不适，呼吸系统和中枢神经系统不良反应，同时全球流感监测网络在世卫组织合作中心和其它实验室支持下进行了系统监测确证了对甲型H1N1流感病毒耐药。扎那米韦临床采用经口吸入，药粉被直接吸入到病毒的复制部位(呼吸道内)而发挥作用，局部给药给临床患者带来极大不便，可诱导支气管痉挛，不推荐潜在肺疾病患者。正是由于甲型流感病毒高度的变异性而增加了对其预防和治疗难度，因此非常有必要探索高效低毒的新治疗方法。\n[0005] 2、寨卡病毒作为一种RNA病毒，目前尚未开发出有效的疫苗和特异性抗病毒药物及治疗手段。\n[0006] 3、登革热病毒和基孔肯雅病毒感染均未开发出有效的抗病毒药物。\n[0007] 中药(TCM)在中国已有数千年的使用历史。中药主要是基于植物制剂中的多种化学成分，其通过多种分子靶点和细胞机制而相互作用并且同时发挥作用。所述多种成分具有不同的功能：某些可以发挥治疗有效性，而另外一些可以减少毒性或者提高生物利用度。\n目前，植物提取物的混合物已经在世界范围内广泛用于疾病的控制并且越来越被西方国家所接受。\n[0008] 基于中药组合物的抗病毒药物的开发已经有人进行了尝试，但是目前的研究仍处于初步探索阶段，缺少令人信服的实验数据。\n[0009] 名为“一种治疗感染黄病毒科的血液细胞修复中药”的中国专利申请\n201610226648.X公开了一种治疗感染黄病毒科的血液细胞修复中药，据称对登革热病毒、寨卡病毒等导致的疾病有治愈作用；但是，说明书中并未提供具体的实验数据，尤其是抗病毒数据。\n[0010] 名为“一种治疗登革热的中药组合物”的中国专利申请201610424049.9公开了一种治疗登革热的中药组合物，并未提供任何治疗效果数据。\n[0011] 名为“一种治疗登革热的中药制剂及其制备方法”的中国专利申请\n201510408826.6公开了一种治疗登革热的中药制剂，说明书提供了对比试验证明了该中药制剂有一定的治疗效果，但并无直接抗病毒活性数据。\n[0012] 名为“一种治疗登革热的中药制剂的制备方法”的中国专利申请201410607204.1公开了一种治疗登革热的中药制剂及其制备方法，说明书提供了药物毒性数据以及临床数据证明了该中药制剂有一定的治疗效果，但并无直接抗病毒活性数据。\n发明内容\n[0013] 因此，提供一种具有抗病毒活性的药物组合物是人们所期望的。尤其是，人们迫切需要一种能有效对抗甲型流感病毒、寨卡病毒、登革热病毒、基孔肯雅病毒等急性传染病病毒的药物组合物。\n[0014] 发明人出人意料地发现以蒲公英、百部、山慈菇为主要原料药配制成的中药组合物具有显著的抗病毒效力，尤其是对于甲型流感病毒、寨卡病毒、登革热病毒、基孔肯雅病毒等多种急性传染病病毒具有广谱、高效抗病毒活性。\n[0015] 发明人通过体外直接灭杀病毒实验发现：以蒲公英、百部、山慈菇为主要原料药配制成的中药组合物针对正粘液病毒科、黄病毒科和披膜病毒科的病毒具有显著的抗病毒活性，特别是针对黄病毒科黄病毒属、披膜病毒科甲病毒属和正粘液病毒科甲型流感病毒属的病毒，例如甲型流感病毒(包括H1N1、H7N7和H9N2病毒等)、寨卡病毒、登革热病毒(包括登革热I型和登革热II型病毒)、基孔肯雅病毒等，具有显著的抗病毒活性。\n[0016] 因此，在一些具体实施方式中，本发明提供了一种抗病毒中药组合物，其是由蒲公英、百部、山慈菇药材为原料药制备而成的。\n[0017] 本发明组合物中的各原料中药都是常用中药，在《中国药典》以及《中华本草》等中均有详细的记载，并且都可以通过商业途径容易地获得。本发明对这些中药材的产地来源等并无特别限制，只要符合相关国家标准或规定即可。\n[0018] 在本说明书中，术语“蒲公英”(Herba Taraxaci)指菊科植物蒲公英Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.、碱地蒲公英Taraxacum sinicum Kitag.或同属数种植物的干燥全草。\n[0019] 在本说明书中，术语“百部”(Radix Stemonae)是指百部科植物直立百部Stemona sessilifolia(Miq.)Miq.、蔓生百部Stemona japonica(Bl.)Miq.或对叶百部Stemona tuberosa Lour.的干燥块根。\n[0020] 在本说明书中，术语“山慈菇”是指兰科植物杜鹃兰Cremastra appendiculata(D.Don)Makino干燥假鳞茎，亦称“毛慈菇”。\n[0021] 业已发现，当蒲公英、百部、山慈菇的重量比在以下范围内时，所得中药组合物的抗病毒效果尤佳：蒲公英药材的重量为30-70份，百部药材的重量为20-40份，山慈菇药材的重量为20-40份。\n[0022] 因此，在一些具体实施方式中，本发明提供了一种抗病毒中药组合物，其包括以下配比的原料药：30-70重量份的蒲公英(优选35-65份，更优选35-55份，最优选40-50份)，20-\n40重量份的百部(优选20-35份，更优选25-33份)，20-40重量份的山慈菇(优选20-35份，更优选25-33份)。\n[0023] 优选的，所述蒲公英的重量为35-65份，百部的重量为20-35份，山慈菇的重量为\n20-35份。\n[0024] 更优选的，所述蒲公英的重量为35-55份，百部的重量为25-35份，山慈菇的重量为\n25-35份。\n[0025] 更优选的，所述蒲公英的重量为40-50份，百部的重量为25-33份，山慈菇的重量为\n25-33份。\n[0026] 本领域技术人员可以理解：以上所述每一味原料药的任意一个优选用量范围可以与其他原料药的任意一个优选用量范围任意组合，所得各种组合方式都构成本发明的特定实施方式。\n[0027] 在另一些优选实施方式中，本发明提供了一种抗病毒中药组合物，其中各原料药的用量比例如本说明书中提供的各个具体实施例所述，且每味药的用量相对于实施例中的具体用量可以有约±16％范围内的变动，更优选的每味药的用量相对于实施例中的具体用量可以有约±10％、±5％、±3％、±2％或±1％范围内的变动。\n[0028] 已经发现：当各药材的重量比在以上优选的范围内时，根据本发明的中药组合物的抗病毒活性尤其显著。\n[0029] 本发明的抗病毒中药组合物，可以直接以各原料药的组合方式(例如药包)提供，患者抓药后可以按照中医传统方法直接加水煎服。但是，优选的，本发明的抗病毒中药组合物可以采用现代中药加工处理方式，制成中药提取物组合物(例如预混物)的形式，这样患者用药会更加方便快速。\n[0030] 因此，在一些具体实施方式中，本发明提供了一种抗病毒中药组合物，其包括原料药蒲公英、百部、山慈菇的提取物，其中各原料药的相对比例如下：蒲公英为30-70重量份(优选35-65份，更优选35-55份，最优选40-50份)，百部为20-40重量份(优选20-35份，更优选25-33份)，山慈菇为20-40重量份(优选20-35份，更优选25-33份)。\n[0031] 在本说明书中，术语“提取物”是指通过使用水或有机溶剂提取中药材原料而获得的提取物。优选地，可以使用提取溶剂如水、C1-C6醇、己烷、氯仿、乙酸甲酯、乙醚等获得的提取物，更优选地，提取溶剂为水、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、己醇或其组合，最优选地，提取溶剂选自水、乙醇或其组合。\n[0032] 最优选地，本发明所述的中药组合物中的提取物为各原料药的水提取物和乙醇提取物的组合。这里，“水提取物”是指采用水(包括冷水、温水或热水)提取中药材获得的提取物。这里，“乙醇提取物”是指采用纯乙醇或乙醇水溶液提取中药材获得的提取物。\n[0033] 优选的，本发明所述的中药组合物中的提取物是经干燥的。最优选的，本发明所述的中药组合物中的提取物是干燥的粉末或颗粒形式。\n[0034] 为了获得提取物组合物形式的本发明的中药组合物，例如，可以用水对各中药材进行提取，获得水提取物；也可以用各种浓度(例如40-95％)乙醇水溶液对各种药材进行提取，获得乙醇提取物；也可以将水提取物和乙醇提取物两者合并在一起，得到水提取物和乙醇提取物的组合。在一些优选实施方式中，本发明的中药组合物包括水提取物和乙醇提取物的组合。\n[0035] 本领域技术人员可以根据需要确定具体的提取步骤和提取顺序，例如可以每味药单独提取再合并提取物，或者将一部分或全部种药材先组合在一起再一并提取。不同的提取工艺和操作步骤会影响提取效率和工艺效率。一种比较快速有效的提取方式是：将待提取中药材分成A、B两组，一组用水提取，得水提取物；将第一组的提取残留物与第二组合并后用醇(或醇的水溶液)提取，得醇提取物；再将所得水提取物和醇提取物两者合并。或者反之，将待提取中药材分成A、B两组，一组用醇(或醇的水溶液)提取，得醇提取物；将第一组的提取残留物与第二组合并后用水提取，得水提取物；再将所得醇提取物和水提取物两者合并。\n[0036] 因此，在一些具体实施方式中，本发明还进一步提供了抗病毒中药组合物的制备方法，其包括：\n[0037] 1)取蒲公英、百部以及任选的其他药材，加醇提取，得醇提取物；\n[0038] 2)将步骤1)醇提取物的制备中生成的药渣与山慈菇药材以及任选的其他药材合并，加水提取，将所得水提取液浓缩后加醇沉淀，取上清液得水提取物；\n[0039] 3)合并步骤1)所得醇提取物和步骤2)所得水提取物，经任选的后处理即得到所述抗病毒中药组合物；\n[0040] 其中各药材的用量如下：蒲公英为30-70重量份，百部为20-40重量份，山慈菇为\n20-40重量份(各药材的优选用量如前文所述)。\n[0041] 优选的，以上步骤所述醇是指乙醇的水溶液，例如为40-95％的乙醇水溶液、或40-\n80％的乙醇水溶液。取决于具体实施方式，可以使用60％、65％、70％、75％、90％等各种浓度的乙醇水溶液。\n[0042] 步骤3)所述的“后处理”是本领域公知的常规后处理步骤，本领域技术人员根据最终想要的组合物形式可以适当确定所需的后处理操作。例如，如果只需要溶液形式的组合物作为中间产品，则不需要任何后处理步骤。另一方面，如果需要固体形式的组合物，则后处理步骤可以包括浓缩、然后干燥从而获得固体形式的组合物。所述干燥可以采用制药领域常用的任何干燥方法，例如喷雾干燥、微波干燥、真空干燥等。\n[0043] 以上所述步骤1)、步骤2)、步骤3)之前、之后或步骤中间都可以包括其他额外操作，例如为了操作方便，对步骤1)获得的醇提取物可以进行浓缩，对步骤2)获得的水提取物也可以进行浓缩。必要时，也可以进行灭菌操作。\n[0044] 本说明书中，用“任选的”修饰的药材、组分等表示该药材或组分根据需要在某些实施方式中可以存在，而在其他某些实施方式中可以不存在。类似地，用“任选的”或“任选地”修饰的操作或步骤表示该步骤或操作根据需要在某些实施方式的方法中可以存在，而在其他某些实施方式的方法中可以不存在。\n[0045] 发明人发现，采用以上步骤1)至步骤3)的提取方法会提高提取效率，从经济上考虑更加合算。\n[0046] 每一步骤中的具体提取时间、重复次数、乙醇溶液的浓度、提取溶剂的用量等操作参数可以根据需要进行适当调整。\n[0047] 在一些实施方式中，步骤1)所述醇提取物的制备方法为：取蒲公英、百部药材，加\n6-10倍量乙醇回流提取1-3次，每次1-2小时，过滤，合并提取液，减压浓缩，即得所述醇提取物。例如，可以加8倍量40-95％乙醇(例如60％、75％或90％的乙醇水溶液)提取1个半小时，过滤；然后再加8倍量40-95％乙醇(例如60％、75％或90％的乙醇水溶液)提取1个半小时，过滤；合并两次所得滤液，即得醇提取物。\n[0048] 在一些实施方式中，步骤2)所述水提取物的制备方法为：取所述醇提取物的制备中生成的药渣与山慈菇药材合并，加6-12倍量水回流提取1-3次，每次1-4小时，过滤，合并所得滤液，浓缩成稠膏；然后向稠膏中加乙醇水溶液(例如70-95％乙醇水溶液)至乙醇终浓度为60-80％，静置沉淀12-48小时，过滤除去滤渣，即得所述水提取物。例如，取所述醇提取物的制备中生成的药渣，与山慈菇药材合并，加10倍量水提取2个小时，过滤；然后再加10倍量水提取2个小时，过滤，合并两次所得滤液，即得水提液；浓缩成稠膏，加75％或90％的乙醇水溶液至乙醇终浓度为约70％，静置沉淀36小时，过滤除去滤渣得水提取物；\n[0049] 在一些实施方式中，步骤3)所述操作为：合并步骤1)所得醇提取物和步骤2)所得水提取物，浓缩并喷雾干燥，得到所述抗病毒中药组合物。。\n[0050] 本发明的抗病毒中药组合物由蒲公英、百部、山慈菇药材为原料药制备而成。本领域技术人员会明白：除了以上3味中药外，本发明的抗病毒中药组合物还可以根据需要或为了其他目的而含有其他中药材。\n[0051] 例如，发明人业已发现，在本发明的抗病毒中药组合物中额外加入选自葛根、白术、白薇和其组合组成的组的至少一味中药材后，本发明的中药组合物的抗病毒效力得以保持或甚至进一步提高，同时所得组合物在细胞毒性方面的表现有所提高，也更适合于体内应用。\n[0052] 在本说明书中，术语“葛根”(Radix Puerariae)是指豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi或甘葛藤Pueraria thomsonii Benth.的干燥根。\n[0053] 在本说明书中，术语“白术”(Rhizoma Atractylodis Macrocephalae)是指菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根茎。\n[0054] 在本说明书中，术语“白薇”(Radix Cynanchi Atrati)是指萝藦科植物白薇Cynanchum atratum Bge.或蔓生白薇Cynanchum versicolor Bge.的干燥根及根茎。\n[0055] 业已发现，当蒲公英、百部、山慈菇、葛根、白术、白薇的重量比在以下范围内时，所得中药组合物的抗病毒效果和体内表现尤佳：蒲公英药材的重量为30-70份，百部药材的重量为20-40份，山慈菇药材的重量为20-40份，白薇药材的重量为19-51份，葛根药材的重量为19-51份，白术药材的重量为20-60份。\n[0056] 因此，在一些具体实施方式中，本发明提供了一种抗病毒中药组合物，其包括蒲公英、百部、山慈菇原料药，还包括选自葛根、白术和白薇之中的至少一种原料药，其中各原料药的用量比例为：蒲公英为30-70重量份(优选35-65份，更优选35-55份，最优选40-50份)，百部为20-40重量份(优选20-35份，更优选25-33份)，山慈菇为20-40重量份(优选20-35份，更优选25-33份)，白薇为19-51重量份(优选20-44份，更优选26-35份)，葛根为19-51重量份(优选20-44份，更优选26-35份)，白术为20-60重量份(优选25-55份，更优选30-50份)。\n[0057] 因此，在一些具体实施方式中，本发明提供了一种抗病毒中药组合物，其包括以下配比的原料药：30-70重量份的蒲公英(优选35-65份，更优选35-55份，最优选40-50份)，20-\n40重量份的百部(优选20-35份，更优选25-33份)，20-40重量份的山慈菇(优选20-35份，更优选25-33份)，白薇为19-51重量份(优选20-44份，更优选26-35份)，葛根为19-51重量份(优选20-44份，更优选26-35份)，白术为20-60重量份(优选25-55份，更优选30-50份)。\n[0058] 根据以上实施方式的抗病毒中药组合物，优选地被加工成中药提取物预混物的形式，以便于患者用药。因此，在一些具体实施方式中，本发明提供了一种抗病毒中药组合物，其包括蒲公英、百部、山慈菇原料药的提取物，还包括选自葛根、白术和白薇之中的至少一种原料药的提取物，其中各原料药的用量比例为：蒲公英为30-70重量份(优选35-65份，更优选35-55份，最优选40-50份)，百部为20-40重量份(优选20-35份，更优选25-33份)，山慈菇为20-40重量份(优选20-35份，更优选25-33份)，白薇为19-51重量份(优选20-44份，更优选26-35份)，葛根为19-51重量份(优选20-44份，更优选26-35份)，白术为20-60重量份(优选25-55份，更优选30-50份)。\n[0059] 在一些具体实施方式中，本发明提供了一种抗病毒中药组合物，其包括原料药蒲公英、百部、山慈菇、葛根、白术、白薇的提取物，其中各原料药的相对比例如下：蒲公英为\n30-70重量份(优选35-65份，更优选35-55份，最优选40-50份)，百部为20-40重量份(优选\n20-35份，更优选25-33份)，山慈菇为20-40重量份(优选20-35份，更优选25-33份)，白薇为\n19-51重量份(优选20-44份，更优选26-35份)，葛根为19-51重量份(优选20-44份，更优选\n26-35份)，白术为20-60重量份(优选25-55份，更优选30-50份)。\n[0060] 这里的术语“提取物”具有与上文完全相同的含义，上文提到的“提取物”各种优选项同样适用于此处。\n[0061] 因此，在一些具体实施方式中，本发明还进一步提供了抗病毒中药组合物的制备方法，其包括：\n[0062] 1)取蒲公英、百部、白薇药材以及任选的其他药材，加醇提取，得醇提取物；\n[0063] 2)将步骤1)醇提取物的制备中生成的药渣与葛根、白术、山慈菇药材以及任选的其他药材合并，加水提取，将所得水提取液浓缩后加醇沉淀，取上清液得水提取物；\n[0064] 3)合并步骤1)所得醇提取物和步骤2)所得水提取物，经任选的后处理即得到所述抗病毒中药组合物；\n[0065] 其中各药材的用量如下：蒲公英为30-70重量份，百部为20-40重量份，山慈菇为\n20-40重量份，白薇为19-51重量份，葛根为19-51重量份，白术为20-60重量份。\n[0066] 以上步骤所述醇是指乙醇水溶液，例如为40-95％的乙醇水溶液、或40-80％的乙醇水溶液。取决于具体实施方式，可以使用60％、65％、70％、75％、90％等各种浓度的乙醇水溶液。步骤3)所述的“后处理”是本领域技术人员根据最终想要的组合物形式可以适当确定的。\n[0067] 本发明的中药组合物，作为药物活性物质，需要时可加入药物可接受的载体或助剂，按照制剂学常规技术制成所需的制剂。制剂中的药物活性物质，可以是0.1-99.9％(例如1-99％或50-98％或50-95％等)，其余作为药物可接受的载体或助剂。\n[0068] 本发明的制剂可以是任何可药用的剂型，包括：颗粒剂，片剂，糖衣片剂，薄膜衣片剂，肠溶衣片剂，胶囊剂，口服液，滴丸剂，冲剂，丸剂，散剂，混悬剂，粉剂等。\n[0069] 优选的，本发明的制剂是口服剂型，如：颗粒剂，片剂，胶囊剂，丸剂等。\n[0070] 优选的，本发明的药物制剂，以单位剂量形式存在，所述单位剂量形式是指制剂的单位，如片剂的每片，颗粒剂每袋，胶囊的每粒胶囊等。\n[0071] 单位剂量形式的制剂中优选含1％左右至90％左右(例如20％-80％或30-60％)的活性成分。例如，胶囊、片剂或糖衣丸等单次给药的单位剂型可含有约1mg至约100g(例如\n10mg至80g、50mg至50g、1g-20g等)的活性成分。\n[0072] 为了制成合适的剂型，作为药物活性物质的本发明的中药组合物可以任选地与适于给药的无机或有机、固体或液体可药用载体或助剂混合或结合。例如，适合的载体特别包括填充剂如糖(例如乳糖)、甘露醇或山梨醇、纤维素制品和/或磷酸钙(磷酸三钙或磷酸氢钙)；粘合剂如淀粉糊、明胶、甲基纤维素和/或聚乙烯乙烯吡咯烷酮；崩解剂如淀粉、羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐(如海藻酸纳)。\n[0073] 在一些具体实施方式中，本发明还提供了为有治疗需要的患者治疗病毒感染性疾病或病状的方法，该方法包括给患者施用有效量的根据本发明任一实施方式的中药组合物。其中，所述患者优选是哺乳动物，尤其优选人。所述施用优选是经口施用。\n[0074] 在一些具体实施方式中，本发明还提供了根据本发明任一实施方式的中药组合物在治疗患者的由病毒导致的疾病或病状方面的用途。其中，所述患者优选是哺乳动物，尤其优选人。\n[0075] 在一些具体实施方式中，本发明还提供了根据本发明任一实施方式的中药组合物在制备用于治疗病毒感染性疾病或病症的药物中的用途。其中，所述疾病或病症优选是哺乳动物、尤其是人的疾病或病症。所述药物优选是口服药物。\n[0076] 在一些具体实施方式中，本发明还提供了用于治疗病毒感染性疾病或病症的根据本发明任一实施方式的中药组合物。其中，所述疾病或病症优选是哺乳动物、尤其是人的疾病或病症。所述中药组合物优选用于口服。\n[0077] 在本说明书中，术语“治疗”指对病毒感染性疾病或病症的预防性或防止性治疗、以及治愈性或缓解性治疗。\n[0078] 在本说明书中，术语“病毒感染性疾病或病症”和“由病毒导致的疾病或病状”具有相同的含义，可互换使用，是指由病毒的传播和感染导致的疾病或病症。\n[0079] 尤其适于采用本发明的中药组合物进行治疗的病毒感染性疾病或病症是由正粘液病毒科、黄病毒科和披膜病毒科的病毒所导致的疾病或病症，特别是黄病毒科黄病毒属、披膜病毒科甲病毒属和正粘液病毒科甲型流感病毒属的病毒所导致的疾病或病症，例如流感、东部马脑炎(EEE)、西部马脑炎(WEE)、委内瑞拉马脑炎(VEE)、乙型脑炎(JE)、森林脑炎(RSSE)、丙型肝炎(HCV)、登革热等。最优选地，本发明的中药组合物尤其适用于治疗或预防由甲型流感病毒(包括H1N1、H7N7和H9N2病毒等)、寨卡病毒、登革热病毒(包括登革热I型和登革热II型病毒)、基孔肯雅病毒导致的疾病，包括：流感、基孔肯雅热、登革热(Dengue Fever,DF)、登革出血热(Dengue Haemorrhagic Fever,DHF)、登革休克综合症(Dengue Shock Syndrome,DSS)、寨卡病毒病、小头畸形病(Microcephaly)等。\n[0080] 治疗中给药的具体方式和剂量可以由主治医生考虑患者的具体情况，尤其是年龄、体重、生活方式、活动水平、疾病严重程度等条件来选择。\n[0081] 一般情况下，哺乳动物的单次给药量约在1-20,000mg/kg范围内。例如，对于优选的治疗人类患者来说，当以中药提取物预混物形式给药时，合适的剂量可以在1-2,000mg/kg、2-1,000mg/kg、5-500mg/kg或10-100mg/kg范围内。如果需要，也可以把此给药量分成任选地平均的几份服用。以上提及的剂量可以按照一定间隔重复施用，例如，每天三次、每天一次、每周一次等等。\n[0082] 本说明书中，“mg/kg”或“mg·kg-1”的意思是按照待治疗的哺乳动物(包括人)的每公斤体重计给药的毫克数，“g/kg”或“g·kg-1”的意思是按待治疗的哺乳动物(包括人)的每公斤体重计给药的克数。\n[0083] 以上所提到的本发明的各个具体实施方式和各个特征的优选级和优选方面可以任意组合，其组合所得各种技术方案都在本发明的范围内。\n[0084] 本发明的有益效果表现在：\n[0085] 本发明的中药组合物具有抗多种急性传染病病毒毒株活性，并且安全性良好。经体内和体外药效学试验结果证明本发明的中药组合物具有显著抗病毒作用，尤其是抗甲型流感H1N1、H7N7和H9N2病毒、寨卡病毒、登革热I型和登革热II型病毒、基孔肯雅病毒等的广谱抗病毒作用，同时小鼠体内实验未观察到明显的毒性和副作用。\n[0086] 本发明中药组合物有潜力开发成一种口服广谱、抗多种传染性病毒植物复方药，可以用于预防和治疗多种病毒感染性疾病，并可以解决病毒频繁突变导致抗药性的问题，同时安全性良好且使用方便，将是这一疾病领域的临床治疗的革新性重大突破。\n附图说明\n[0087] 图1显示实施例1的组合物体外阻止寨卡病毒对Neuro-2a细胞的感染的实验结果。\n其中，纵坐标“ZIKV E1/β-actin”表示寨卡病毒与Neuro-2a细胞中拷贝结果，计算为相对于每个β肌动蛋白的寨卡病毒E1基因拷贝数；横坐标“Mock”代表病毒对照组(细胞+培养液)；\n“0”代表病毒对照组(细胞+病毒+培养液)。“Drug”表示受试药物；“**”表示p<0.01。\n[0088] 图2显示实施例3组合物体外阻止抑制Vero细胞中登革1型病毒的复制的实验结果。其中，纵坐标“Den1E1/β-actin”表示登革1型病毒在Vero细胞中拷贝结果，计算为相对于每个β肌动蛋白的登革2型病毒E1基因拷贝数；横坐标“Mock”代表病毒对照组(细胞+培养液)；“0”代表病毒对照组(细胞+病毒+培养液)。“Drug”表示受试药物；“**”表示p<0.01。\n[0089] 图3显示实施例6组合物体外阻止抑制Vero细胞中登革2型病毒的复制的实验结果。其中，纵坐标“Den2E1/100β-actin”表示登革2型病毒在Vero细胞中拷贝结果，计算为相对于每100个β肌动蛋白的登革2型病毒E1基因拷贝数；横坐标“Mock”代表病毒对照组(细胞+培养液)；“0”代表病毒对照组(细胞+病毒+培养液)。“Drug”表示受试药物。\n[0090] 图4是表示实施例7中药组合物阻止抑制Vero细胞中登革2型病毒复制的实验结果图示。其中，纵坐标“Den2E1/1000β-actin”表示登革2型病毒在Vero细胞中拷贝结果，计算为相对于每1000个β肌动蛋白的登革2型病毒E1基因拷贝数；横坐标“Mock”代表病毒对照组(细胞+培养液)；“0”代表病毒对照组(细胞+病毒+培养液)。“**”表示p<0.01；“***”表示p<\n0.001。\n[0091] 图5是表示LDH法检测实施例7中药组合物的Vero细胞毒性的实验曲线。纵坐标“％Cytotoxicity”表示细胞毒性百分比，横坐标中“Lysis Buffer”代表细胞裂解液，“Cells only”表示仅有细胞存在。\n[0092] 图6是表示实施例8中药组合物阻止寨卡病毒与Vero细胞结合的实验结果图示。其中，纵坐标“ZIKV E1/β-actin”表示寨卡病毒与Vero细胞的结合结果，计算为相对于每个β肌动蛋白的寨卡病毒E1基因拷贝数；横坐标“Mock”代表病毒对照组(细胞+培养液)；“0”代表病毒对照组(细胞+病毒+培养液)，“Drug”表示受试药物。“*”表示p<0.05。\n具体实施例\n[0093] 以下通过实施例的具体实施方式再对本发明的上述内容作进一步的详细说明。应当理解，此处所描述的具体实例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。在不脱离本发明的精神和原则之内做的任何修改，以及根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的等同替换或者改进，均应包括在本发明的保护范围内。\n[0094] 以下实施例中所报道的数字是尽可能精确的，但是本领域技术人员理解由于不可避免的测量误差和实验操作问题，每一个数字都应该被理解为约数，而不是绝对准确的数字。例如，由于称量器具的误差，关于各实施例组合物中各药物的重量值，应该理解为其可能具有±2％或±1％的误差。\n[0095] 实施例1\n[0096] 实施例1的中药组合物配方如下：\n[0097] 蒲公英：320g\n[0098] 百部：190g\n[0099] 山慈菇：190g\n[0100] 所用的原料药之中，蒲公英采集自中国河北省，部采集自中国广西省，山慈菇采集自中国四川省。\n[0101] 实施例1的中药组合物制备工艺如下：\n[0102] (1)取320g蒲公英，190g百部药材，加8倍量70％乙醇提取1个半小时，然后再加8倍量70％乙醇提取1个半小时，合并提取液，即得醇提液；\n[0103] (2)取所述醇提液的制备中生成的药渣，合并190g山慈菇药材，加10倍量水提取2个小时，然后再加10倍量水提取2个小时，过滤，合并两次所得滤液，即得水提液；浓缩成稠膏，加90％乙醇并搅拌直至乙醇终浓度为约70％，静置36小时，取上清液，得水提液；\n[0104] (3)合并步骤1所得醇提液和步骤2所得水提液，浓缩并喷雾干燥后即得本发明实施例1所述中药组合物。所得组合物为棕色颗粒状，重量约0.1Kg，直接用于下面的实验。\n[0105] 下面对实施例1所述中药组合物(该组合物在实验中被称为“受试药物”或“受试物”)进行各种药效学研究，以验证其药效。\n[0106] 1.实施例1组合物体外抗寨卡病毒(ZIKV)药效学研究\n[0107] Neuro-2a细胞(小鼠神经细胞，购自美国模式培养物保藏所(ATCC)，CCL-131)以6×105/孔铺于六孔板中，37℃，5％CO2中孵育24小时，形成单层细胞。将感染系数为1的寨卡病毒(由美国疾控中心虫媒病毒部门(CDC Arbovirus Branch)提供)与1.0、0.1mg/ml的受试物水溶液混合并加到单层细胞上，4℃孵育1小时。在此温度下，病毒可以与细胞表面的受体结合，但不能进入细胞质。孵育后，细胞以4℃培养液洗涤以移除未结合的病毒。之后，将细胞以Trizol处理收集，并提取总RNA，合成单链cDNA。实时定量PCR法定量寨卡病毒的外壳蛋白基因和看家基因β-actin。实时定量PCR检测具体方法详见Acharya D,Bastola P,Le L,et al.An Ultrasensitive Electrogenerated Chemiluminescence-based Immunoassay for Specific Detection of Zika Virus[J].Scientific Reports,2016,\n6:32227。\n[0108] 结果显示1.0mg/ml、0.1mg/ml浓度受试物均能显著抑制寨卡病毒在Neuro-2a细胞上感染作用，见图1。\n[0109] 实施例2\n[0110] 实施例2的中药组合物配方如下：\n[0111] 蒲公英：500g\n[0112] 百部：400g\n[0113] 山慈菇：400g\n[0114] 所用的原料药之中，蒲公英采集自中国河北省，部采集自中国广西省，山慈菇采集自中国四川省。\n[0115] 实施例2的中药组合物制备工艺如下：\n[0116] (1)取500g蒲公英，400g百部药材，加10倍量60％乙醇提取1个半小时，然后再加10倍量60％乙醇提取1个半小时，合并提取液，即得醇提液；\n[0117] (2)取所述醇提液的制备中生成的药渣，合并400g山慈菇药材，加10倍量水提取2个小时，然后再加10倍量水提取2个小时，过滤，合并两次所得滤液，即得水提液；浓缩成稠膏，加90％乙醇并搅拌直至乙醇终浓度为约75％，静置24小时，取上清液，得水提液；\n[0118] (3)合并步骤1所得醇提液和步骤2所得水提液，浓缩并喷雾干燥后即得本发明实施例2所述中药组合物。所得组合物为棕色颗粒状，重量约0.2Kg，直接用于下面的实验。\n[0119] 下面对实施例2所述中药组合物(该组合物在实验中被称为“受试药物”或“受试物”)进行各种药效学研究，以验证其药效。\n[0120] 1.实施例2组合物体外抗禽流感病毒H1N1的药效学研究\n[0121] 1.1CPE法测定病毒对MDCK细胞的半数毒性浓度(TCID50)\n[0122] 将MDCK细胞(犬肾上皮细胞，由北京市农林科学院畜牧兽医研究所提供)接种于96孔板，每孔100μL，含细胞2×104个/孔，37℃培养24h，细胞长成单层，将甲型流感病毒H1N1株(由北京市农林科学院畜牧兽医研究所提供)原液用培养液依次10倍稀释10-3至10-12共10个浓度加至细胞孔内，每浓度8孔，37℃培养。每天用倒置显微镜观察细胞病变(CPE)，记录细胞病变程度(CPE)。用Reed-Muench法计算病毒半数感染剂量(TCID50)。\n[0123] 实验结果显示：细胞感染病毒后肿胀、拉网、皱缩、聚集成团，甲型流感病毒H1N1的TCID50为10-4.12/0.1ml。\n[0124] 1.2直接灭活甲型流感病毒H1N1流感病毒的测定\n[0125] 将MDCK细胞接种于96孔板，每孔100μL，含细胞2×104个/孔，37℃，5％CO2培养24h，细胞长成单层。抛弃上清液，将不同浓度的药物与等体积的100TCID50流感病毒在管中混匀,作用6h后再将混合液接种于细胞板。设正常细胞对照组、阳性药(金刚烷胺，购自Sigma公司)及病毒对照。吸附2h后,抛上清液,加入细胞维持液,37℃，5％CO2培养箱继续培养。记录细胞病变结果，MTT染色法测定细胞活性。试验重复2次。用统计软件SPSS13.0对数据进行Probit回归分析，计算药物半数有效浓度(IC50)。\n[0126] 结果见表1，其半数抑制浓度(IC50)分别为479μg/mL和481μg/mL，表明受试物具有明显直接灭活甲型流感病毒H1N1流感病毒作用。\n[0127] 表1受试药物抗AIV病毒H1N1活性\n[0128]\n[0129] 实施例3\n[0130] 实施例3的中药组合物配方如下：\n[0131] 蒲公英：450g\n[0132] 百部：250g\n[0133] 山慈菇：400g\n[0134] 所用的原料药之中，蒲公英采集自中国河北省，部采集自中国广西省，山慈菇采集自中国四川省。\n[0135] 实施例3的中药组合物制备工艺如下：\n[0136] (1)取450g蒲公英，250g百部药材，加10倍量60％乙醇提取1个半小时，然后再加10倍量60％乙醇提取1个半小时，合并提取液，即得醇提液；\n[0137] (2)取所述醇提液的制备中生成的药渣，合并400g山慈菇药材，加10倍量水提取2个小时，然后再加10倍量水提取2个小时，过滤，合并两次所得滤液，即得水提液；浓缩成稠膏，加90％乙醇并搅拌直至乙醇终浓度为约75％，静置24小时，取上清液，得水提液；\n[0138] (3)合并步骤1所得醇提液和步骤2所得水提液，浓缩并喷雾干燥后即得本发明实施例3所述中药组合物。所得组合物为棕色颗粒状，重量约0.2Kg，直接用于下面的实验。\n[0139] 下面对实施例3所述中药组合物(该组合物在实验中被称为“受试药物”或“受试物”)进行各种药效学研究，以验证其药效。\n[0140] 1.实施例3组合物体外抗登革1型病毒(dengue-1)药效学研究\n[0141] Vero细胞(非洲绿猴肾细胞，购自美国模式培养物保藏所(ATCC)，CCL-81)以6×\n105/孔铺于六孔板中，5％CO2 37℃孵育24小时，形成单层细胞。受试物溶解于PBS缓冲液中，过滤除菌，分别稀释到1.0和0.1mg/ml。登革1型病毒(由美国康涅狄格农业试验站提供)和\n0.1、1.0mg/ml的受试物分别加入到单层Vero细胞中，37℃下培养24小时，通过qPCR对细胞内病毒复制(登革1型E基因)进行定量分析，qPCR方法具体见Paul A M,Shi Y,Acharya D,et al.Delivery of Antiviral Small Interfering RNA with Gold Nanoparticles Inhibits Dengue Virus Infection in vitro.[J].Journal of General Virology,\n2014,95(8):1712-22.\n[0142] 结果显示，PCR结果显示受试物能够显著抑制体外登革1型病毒的复制，见图2。\n[0143] 实施例4\n[0144] 实施例4的中药组合物配方如下：\n[0145] 蒲公英：540g\n[0146] 百部：480g\n[0147] 山慈菇：300g\n[0148] 所用的原料药之中，蒲公英采集自中国河北省，部采集自中国广西省，山慈菇采集自中国四川省。\n[0149] 实施例4的中药组合物制备工艺如下：\n[0150] (1)取540g蒲公英，480g百部药材，加8倍量70％乙醇提取1个半小时，然后再加8倍量70％乙醇提取1个半小时，合并提取液，即得醇提液；\n[0151] (2)取所述醇提液的制备中生成的药渣，合并300g山慈菇药材，加10倍量水提取2个小时，然后再加10倍量水提取2个小时，过滤，合并两次所得滤液，即得水提液；浓缩成稠膏，加90％乙醇并搅拌直至乙醇终浓度为约75％，静置24小时，取上清液，得水提液；\n[0152] (3)合并步骤1所得醇提液和步骤2所得水提液，浓缩并喷雾干燥后即得本发明实施例4所述中药组合物。所得组合物为棕色颗粒状，重量约0.2Kg，直接用于下面的实验。\n[0153] 下面对实施例4所述中药组合物(该组合物在实验中被称为“受试药物”或“受试物”)进行各种药效学研究，以验证其药效。\n[0154] 1.实施例4组合物体外抗禽流感病毒H9N2的药效学研究\n[0155] 将MDCK细胞(来源同实施例2)接种于96孔板，每孔100μL，含细胞2×104个/孔，37℃，5％CO2培养24h，细胞长成单层。抛去上清液，分别加入1250、625、312.5、156.25、\n78.125、39.062μg/mL受试物，每孔100μL，每浓度4孔。与细胞预作用6h，作用后抛去上清液，加入含100TCID50的禽流感病毒H9N2(由北京市农林科学院畜牧兽医研究所提供)液100μL，吸附2h后，重新加入不同浓度的药物培养基，每孔100μL，4d后终止。实验设正常细胞对照组和阳性药(金刚烷胺，购自Sigma公司)组和病毒对照组。记录细胞病变结果，MTT染色法测定细胞活性。试验重复2次。用统计软件SPSS13.0对数据进行Probit回归分析，计算药物半数有效浓度(IC50)。\n[0156] 实验结果显示：受试物的半数抑制浓度(IC50)分别测定为372μg/mL和392μg/mL，表明具有阻止H9N2病毒吸附细胞的作用，见表2。\n[0157] 表2受试药物抗AIV病毒H9N2活性\n[0158]\n[0159] 实施例5\n[0160] 实施例5的中药组合物配方如下：\n[0161] 蒲公英：360g\n[0162] 百部：200g\n[0163] 山慈菇：200g\n[0164] 所用的原料药之中，蒲公英采集自中国河北省，部采集自中国广西省，山慈菇采集自中国四川省。\n[0165] 实施例5的中药组合物制备工艺如下：\n[0166] (1)取360g蒲公英，200g百部药材，加8倍量70％乙醇提取1个半小时，然后再加8倍量70％乙醇提取1个半小时，合并提取液，即得醇提液；\n[0167] (2)取所述醇提液的制备中生成的药渣，合并200g山慈菇药材，加10倍量水提取2个小时，然后再加10倍量水提取2个小时，过滤，合并两次所得滤液，即得水提液；浓缩成稠膏，加90％乙醇并搅拌直至乙醇终浓度为约75％，静置24小时，取上清液，得水提液；\n[0168] (3)合并步骤1所得醇提液和步骤2所得水提液，浓缩并喷雾干燥后即得本发明实施例5所述中药组合物。所得组合物为棕色颗粒状，重量约0.13Kg，直接用于下面的实验。\n[0169] 下面对实施例5所述中药组合物(该组合物在实验中被称为“受试药物”或“受试物”)进行各种药效学研究，以验证其药效。\n[0170] 1.实施例5组合物体外抗禽流感病毒H7N7的药效学研究\n[0171] 将MDCK细胞(来源同实施例2)接种于96孔板，每孔100μL，含细胞2×104个/孔，37℃，5％CO2培养24h，细胞长成单层。抛去上清液，分别加入1250、625、312.5、156.25、78.12、\n39.06μg/mL受试药物，每孔100μL，每浓度4孔。与细胞预作用6h，作用后抛去上清液，加入含\n100TCID50的禽流感病毒H7N7(由北京市农林科学院畜牧兽医研究所提供)100μL，吸附2h后，重新加入不同浓度的药物培养基，每孔100μL，4d后终止。实验设正常细胞对照组和阳性药(金刚烷胺，购自Sigma公司)组和病毒对照组。记录细胞病变结果，MTT染色法测定细胞活性。试验重复2次。用统计软件SPSS13.0对数据进行Probit回归分析，计算药物半数有效浓度(IC50)。\n[0172] 实验结果显示：受试物的半数抑制浓度(IC50)分别测定为448μg/mL、421μg/mL，表明具有阻止H7N7病毒吸附细胞的作用，见表3。\n[0173] 表3受试药物抗AIV病毒H7N7活性\n[0174]\n[0175] 实施例6\n[0176] 实施例6的中药组合物在3味中药材的基础上加入了葛根和白术，其配方如下：\n[0177] 蒲公英：450g\n[0178] 百部：300g\n[0179] 山慈菇：300g\n[0180] 葛根：500g\n[0181] 白术：300g\n[0182] 所用的原料药之中，蒲公英采集自中国河北省，葛根采集自中国河北省，百部采集自中国广西省，山慈菇采集自中国四川省，白术采集自中国浙江省。\n[0183] 实施例6的中药组合物制备工艺如下：\n[0184] (1)取450g蒲公英，300g百部药材，加8倍量70％乙醇提取1个半小时，然后再加8倍量70％乙醇提取1个半小时，合并提取液，即得醇提液；\n[0185] (2)取所述醇提液的制备中生成的药渣，合并500g葛根，300g山慈菇，300g白术药材，加10倍量水提取2个小时，然后再加10倍量水提取2个小时，过滤，合并两次所得滤液，即得水提液；浓缩成稠膏，加90％乙醇并搅拌直至乙醇终浓度为约75％，静置24小时，取上清液，得水提液；\n[0186] (3)合并步骤1所得醇提液和步骤2所得水提液，浓缩并喷雾干燥后即得本发明实施例7所述中药组合物。所得组合物为棕色颗粒状，重量约0.3Kg，直接用于下面的实验。\n[0187] 下面对实施例6所述中药组合物(该组合物在实验中被称为“受试药物”或“受试物”)进行体外药效学研究，以验证其药效。\n[0188] 1.实施例6组合物体外抗登革2型病毒(dengue-2)药效学研究\n[0189] Vero细胞及受试物配制同实施例3。将登革2型病毒(购自美国模式培养物保藏所ATCC，VR-1584)和0.1、1.0mg/ml的受试物分别加入到单层Vero细胞中，37℃下培养24小时，通过qPCR对细胞内病毒复制(登革2型E基因)进行定量分析，具体分析方法见Paul A M,Shi Y,Acharya D,et al.Delivery of Antiviral Small Interfering RNA with Gold Nanoparticles Inhibits Dengue Virus Infection in vitro.[J].Journal of General Virology,2014,95(8):1712-22.\n[0190] 实验结果显示，PCR结果显示受试物能够显著抑制体外登革2型病毒的复制，见图\n3。\n[0191] 实施例7\n[0192] 实施例7的中药组合物在3味中药材的基础上加入了葛根、白术、白薇，其配方如下：\n[0193] 蒲公英：470g\n[0194] 百部：280g\n[0195] 山慈菇：280g\n[0196] 白薇：315g\n[0197] 葛根：315g\n[0198] 白术：380g\n[0199] 所用的原料药之中，蒲公英采集自中国河北省，白薇采集自中国河南省，葛根采集自中国河北省，百部采集自中国广西省，山慈菇采集自中国四川省，白术采集自中国浙江省。\n[0200] 实施例7的中药组合物制备工艺如下：\n[0201] (1)取470g蒲公英、280g百部、315g白薇药材，加8倍量60％乙醇提取1个半小时，过滤；然后再加8倍量60％乙醇提取1个半小时，过滤；合并两次所得滤液，即得醇提液；\n[0202] (2)取所述醇提液的制备中生成的药渣，合并315g葛根、280g山慈菇、380g白术药材，加10倍量水提取2个小时，然后再加10倍量水提取2个小时，过滤，合并两次所得滤液，浓缩成稠膏，加90％乙醇并搅拌直至乙醇终浓度为约75％，静置24小时，取上清液，得水提液；\n[0203] (3)合并步骤1所得醇提液和步骤2所得水提液，浓缩并喷雾干燥后即得本发明实施例7所述中药组合物。所得组合物为棕色粉末状，重量约0.34Kg，直接用于下面的体外体内实验。\n[0204] 下面对实施例7所述中药组合物(该组合物在实验中被称为“受试药物”或“受试物”)进行各种药效学研究，以验证其药效。\n[0205] 1.实施例7组合物体外抑制登革2型病毒(Dengue-2)复制试验\n[0206] Vero细胞(非洲绿猴肾细胞，购自美国模式培养物保藏所(ATCC)，CCL-81)以6×\n105/孔铺于六孔板中，5％CO2 37℃孵育24小时，形成单层细胞。受试物溶解于PBS缓冲液中，过滤除菌，分别稀释到1.0和0.1mg/ml。将登革2型病毒(购自美国模式培养物保藏所ATCC，VR-1584)和0.1mg/ml、1.0mg/ml的受试物分别加入到Vero单层细胞中，37℃下培养24小时，通过qPCR对细胞内病毒复制(登革2型E基因)进行定量分析，具体分析方法见Paul A M,Shi Y,Acharya D,et al.Delivery of Antiviral Small Interfering RNA with Gold Nanoparticles Inhibits Dengue Virus Infection in vitro.[J].Journal of General Virology,2014,95(8):1712-22.\n[0207] PCR实验结果显示受试物能够显著抑制体外登革2型病毒的复制(见图4)。\n[0208] 2.乳酸脱氢酶(LDH)法检测实施例7组合物对Vero细胞毒性\n[0209] 试验采用LDH  Cytotoxicity  Detection  KitPLUS试剂盒(购自Roche Diagnostics)，操作方式详见试剂盒说明书，过程简单描述如下：Vero细胞(购自美国模式培养物保藏所(ATCC)，CCL-81)以100μL 4×104/孔铺于96孔细胞培养板中，并设置两个复孔(即每个实验一式两份)。培养板以5％CO2 37℃孵育过夜。受试物溶解于PBS缓冲液中，过滤除菌，分别稀释到1.0、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.0156mg/ml。10μL不同浓度(2.0、\n1.0、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.0156mg/ml)的受试物加入细胞培养板中，以10μL PBS作为空白对照，同样设两个复孔。培养板以5％CO2 37℃孵育24和48小时。孵育后，用ELx808Ultramicroplate Reader酶标仪(Bio Tek)于450nm处读数，测定培养液中LDH浓度，按照试剂盒说明书计算细胞毒性。\n[0210] 实验结果显示，受试物在2mg/ml浓度下孵育48小时，不引起明显的Vero细胞毒性(见图5)。这些结果排除了受试物抑制登革病毒的作用是由细胞毒性所引起的可能性，进一步确认受试物在体外能够抑制登革病毒感染。\n[0211] 实施例8\n[0212] 实施例8的中药组合物配方如下：\n[0213] 蒲公英：680g\n[0214] 百部：390g\n[0215] 山慈菇：400g\n[0216] 白薇：480g\n[0217] 葛根：440g\n[0218] 白术：540g\n[0219] 原料药的来源同实施例7。实施例8的中药组合物制备工艺如下：\n[0220] (1)取680g蒲公英、390g百部、480g白薇药材，加10倍量60％乙醇提取1个半小时，过滤；然后再加10倍量60％乙醇提取1个半小时，过滤；合并两次所得滤液，即得醇提液；\n[0221] (2)取所述醇提液的制备中生成的药渣，合并440g葛根、400g山慈菇、540g白术药材，加8倍量水提取2个小时，然后再加8倍量水提取2个小时，过滤，合并两次所得滤液，浓缩成稠膏，加90％乙醇并搅拌直至乙醇终浓度为约75％，静置24小时，取上清液，得水提液；\n[0222] (3)合并步骤1所得醇提液和步骤2所得水提液，浓缩并喷雾干燥后即得本发明所述中药组合物。所得组合物为棕色粉末状，重量约0.5Kg，直接用于下面的体外体内实验。\n[0223] 下面对实施例8所述中药组合物(该组合物在实验中被称为“受试药物”或“受试物”)进行各种药效学研究，以验证其药效。\n[0224] 1.实施例8组合物体外抗寨卡病毒(ZIKV)药效学研究\n[0225] Vero细胞(非洲绿猴肾细胞，购自美国模式培养物保藏所(ATCC)，CCL-81)以6×\n105/孔铺于六孔板中，5％CO2 37℃孵育24小时，形成单层细胞。将感染系数为1的寨卡病毒(由美国疾控中心虫媒病毒部门(CDC Arbovirus Branch)提供)与1.0mg/ml、0.1mg/ml的受试物水溶液混合并加到Vero单层细胞上，4℃孵育1小时。在此温度下，病毒可以与细胞表面的受体结合，但不能进入细胞质。孵育后，细胞以4℃培养液洗涤以移除未结合的病毒。之后，将细胞以Trizol处理收集，并提取总RNA，合成单链cDNA。实时定量PCR法定量寨卡病毒的外壳蛋白基因和看家基因β-actin。具体方法详见Acharya D,Bastola P,Le L,et al.An Ultrasensitive Electrogenerated Chemiluminescence-based Immunoassay for Specific Detection of Zika Virus[J].Scientific Reports,2016,6:32227。\n[0226] 结果显示，1.0mg/ml、0.1mg/ml浓度的组合物分别能够阻止约80％和40％寨卡病毒与受体结合(见图6)。\n[0227] 综合实施例7、8的以上体外实验数据，这些实验结果表明：在蒲公英、百部、山慈菇的三味基础中药材基础之上，加入葛根、白术、白薇后，所得组合物仍然具有高效的灭杀寨卡病毒、登革病毒等抗病毒活性，而且葛根、白术、白薇的加入看起来改善了基础中药组合物细胞毒性(但是改善的内在机理目前尚不明确)，使得该组合物的实用性得到加强，为进一步开发临床药物指引了方向。\n[0228] 尽管上文已经对具体实施例进行了具体描述，本领域的技术人员可以理解的是，在不脱离本发明的精神的范围内可进行形式和细节上的改变和组合。可以理解，在不脱离本文披露的和根据所附权利要求所解释的较宽的范围内，可以对不同实施例的适应性描述做出各种改变。