一种酶活和稳定性提高的甲酸脱氢酶突变体及其构建方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201610978442.2
IPC分类号：C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70
申请日期：
2016-11-08
申请人：
江南大学

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专利名称	一种酶活和稳定性提高的甲酸脱氢酶突变体及其构建方法
申请号	CN201610978442.2	申请日期	2016-11-08
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2017-03-08	公开/公告号	CN106479988A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N9/02 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N9/00 酶，如连接酶（6.）；酶原；其组合物（用于清洁牙齿的含酶的制剂入A61K 8/66、A61Q 11/00；含酶或酶原的医药制剂入A61K 38/43；含酶去污剂组合物入C11D）；制备、活化、抑制、分离或纯化酶的方法〔3〕 C12N9/02 氧化还原酶（1.），如萤虫素酶〔3〕	IPC分类号	C;1;2;N;9;/;0;2;;;C;1;2;N;1;5;/;5;3;;;C;1;2;N;1;5;/;7;0查看分类表>
申请人	江南大学	申请人地址	江苏省无锡市蠡湖大道1800号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	江南大学	当前权利人	江南大学
发明人	饶志明;郑俊贤;杨套伟;周俊平;张显;徐美娟
代理机构	哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司	代理人	张勇

摘要

本发明公开了一种酶活和稳定性提高的甲酸脱氢酶突变体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明的突变体是在SEQIDN0.2所示的氨基酸的基础上，将第10位丙氨酸突变成半胱氨酸。本发明得到的突变体酶比酶活较突变前提高1.3倍，60度的半衰期(t1/2)较突变期提高了6.8倍，铜离子耐受性较突变前提高30倍，pH＝4的条件下稳定性提高了2.0倍同时催化效率提高1.4倍。本发明表明10位氨基酸残基突变成半胱氨酸与天然甲酸脱氢酶的30位半胱氨酸残基形成正确的二硫键从而提高了酶的稳定性和催化效率，加强了该酶的工业应用潜力。

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